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2025-01-16
随着现代信息科技的高速发展和大量的工业化生产,引发人们生活节奏变快及环境污染等现象,导致人们皮肤出现越来越多的问题,其中痤疮就是典型的皮肤问题之一。影响痤疮发生的因素很多,目前研究已被报道的有关影响痤疮的发生主要是因为痤疮丙酸杆菌的大量繁殖导致皮肤的微生态环境遭到破坏,使皮肤皮脂大量分解成游离酸,从而导致皮肤出现红、肿、痛等炎症反应。而中草药具有良好的抗炎功效且受到广泛关注。目前,功效性化妆品的安全性备受关注。中草药提取物作为祛痘功效的原料具有很好的安全性和功效性。
作为第三方检测中心,中科测试机构拥有CMA和CNAS认证检测资质,检测设备齐全,数据科学可靠,可出具国家认可的化妆品祛痘抗炎功效评价报告。
抑制痤疮丙酸杆菌实验
引用《一次性使用卫生用品卫生标准》以及多国药典规定的药敏试验,用受试物对痤疮丙酸杆菌的抑制菌落数目来评估受试物的药敏效果。将痤疮丙酸杆菌接种于加有琼脂粉的梭菌增菌培养基斜面上,在(37±1)℃环境下厌氧培养48~72h。待菌落长满后用5m梭菌增菌培养基将菌落进行洗脱。收集洗脱液并将其浓度调整为106CFU/mL,并用平板法进行活菌计数。称取中草药提取物、含有上述配方的中草药提取物的祛痘精华液、市售祛痘对标品各1g分别加入到上述0.1m菌悬液中,并加入9mL PBS混合后,取1mL置于3个平行平皿内,再加入梭菌增菌培养基在(37±1)℃环境下厌氧培养48~72h后菌落计数,以上实验重复3次,取其平均数,同时设置生理盐水为空白对照。
抑菌率X=(A-B)/Ax100%
式中,4为对照样品平均回收菌落数;B为试验样品平均回收菌落数。
红细胞溶血测试
红细胞溶血测试是利用化学物质对血红蛋白及细胞膜的损伤程度原理来评估受试物的眼刺激作用。红细胞溶血实验作为动物替代实验评估化妆品成品及原料对眼刺激作用,具有较强的相关性和代表性。
通过红细胞溶血测试评估该5种中草药提取物的刺激性。将中草药复合提取物、含有上述配方的中草药提取物的祛痘精华液和对标品分别用生理盐水配制成质量分数为20%,10%,2%,1%,0.5%,0.3%,0.2%和0.1%,体积为2m。取配制好的样品500 μL和质量分数为2%的红细胞500 μL混匀,设置阴性对照(生理盐水)和阳性对照(质量分数为1%SDS),每组设3个平行,静置于37℃生化培养箱中孵育3h.然后将各组样品分别离心后取上清液10 μL和生理盐水90μL置于96孔板内混匀测410,540和575 nm处的吸光度值。取各组的平均值,计算引起50%红细胞发生溶血时的受试物浓度与血红蛋白变性率的比值。
人体斑贴试验
参照《化妆品安全技术规范》(2015年版)、GB 17149.1-1997《化妆品皮肤病诊断标准及处理原则》、GB 17149.2-1997《化妆品接触性皮炎诊断标准及处理原则》进行人体斑贴试验。本研究招募志愿者24名,纳人志愿者标准为:1)年龄在15~60周岁之间:男女均可;2)无严重疾病,无免疫缺陷或自身免疫性疾病,受试部位未曾接受皮肤治疗、美容;3)无活动性过敏疾病;4)近两个月内受试部位未应用任何抗炎药物者;5)近一周使用抗组胺药或近一个月未使用免疫抑制剂者。6)近一个月内未进行斑贴测试者。排除标准:1)妊娠或哺乳期妇女;2)合并有心、肺、脑血管、肝、肾和造血系统等严重性疾病及精神病患者3)正在接受治疗的哮喘或其他慢性呼吸系统疾病患者。中止及退出标准:在试验期间未按测试要求进行涂抹受试样品或未按要求进行回访记录。签署志愿者知情同意书,先将所有斑试器背面做样品序号标记并加入等量的祛痘精华液,对照组为不加任何物质的空白组,将处理好的斑试器贴敷于受试者的前臂曲侧,设置三组平行和一个空白组,分别持续24和48h后观察皮肤状态。皮肤斑贴后反应程度分级如下:
反应程度-,等级0,皮肤反应为阴性反应
反应程度±,等级1,皮肤反应为可疑红斑反应
反应程度+,等级2,皮肤反应为弱阳性反应(红斑反应):红斑、浸润、水肿、可有丘疹
反应程度++,等级3,皮肤反应为强阳性反应(疱疹反应):红斑、浸润、水肿、丘疹、疱疹;反应超出受试区
反应程度+++,等级4,皮肤反应为极强阳性反应(融合性疱疹反应):明显红斑、严重浸润、水肿、融合性疱疹;反应超出受试区
人体皮肤水分含量、皮肤油脂含量及皮肤图像测试
选取面部有明显痘痘、粉刺和炎症症状的志愿者48名、年龄区间为20~30岁,无严重疾病,无免疫缺陷或自身免疫性疾病,受试部位未曾接受皮肤治疗、美容以及其他可能影响结果的测试。排除对象同上并签志愿者知情同意书。测试前由皮肤科医生对志愿者的脸部分别记录白头粉刺、黑头粉刺、炎性丘疹、脓胞等数目与位置并记录皮损分值。
皮损类型分值:
无皮损:数量为0,皮损分值为0分
白头粉刺:数量≥1,皮损分值为1分
黑头粉刺:数量≥1,皮损分值为2分
炎性丘疹:数量≥1,皮损分值为3分
脓头丘疹:数量≥1,皮损分值为4分
用VISIA对志愿者进行正脸拍照。将志愿者随机分为两组,一组用受试物、另一组用对标品(市面上口碑较好含有1%水杨酸有效成分的祛痘化妆品)分别以涂抹的方式涂抹于全脸,早晚持续使用28d,在第14天(D14)及第28天(D28)回访,分别记录志愿者主观感受和脸部粉刺等情况并进行VISIA拍照。

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