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化妆品祛斑美白功效评价方法:细胞水平的功效测定与动物试验法
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  • 2025-01-16

  随着经济和科学技术的飞速发展,人们的生活水平逐渐提高,对于化妆品的需求已经从以往单一的护理型向现代的功能型转化。人们对美白的理念发生了根本性的改变,从而激发祛斑美白化妆品市场的潜能,有关美白、美白剂、祛斑效果评价以及祛斑机理等方面的研究成为国内外的热点,祛斑美白产品受到众多生产商的关注。




  作为第三方检测中心,中科测试机构拥有CMA和CNAS认证检测资质,检测设备齐全,数据科学可靠,可出具国家认可的化妆品祛斑美白功效评价报告。


  皮肤祛斑美白途径


  根据黑素生成的机理得到两个主要祛斑途径:一是防止黑素的生成;二是促进生成的色素排泄至体外。


  黑色素的生成需要在酶,如酪氨酸酶、多巴色素互变酶、DHI氧化酶以及DHICA氧化酶的作用下进行,其中酪氨酸酶是最重要的一种。目前市场上销售的许多祛斑美白产品都是以抑制酪氨酸酶而得以实现功效性的,然而近几年研究中发现多巴色素互变酶和DHICA氧化酶对黑素生成影响也大,抑制这两种酶的作用同样可以减少黑色素的生成。


  将皮肤色素排出体外有两种方式,一是黑色素、脂褐素和血红素在一定条件下会自行向角质层逐渐转移,最终随老化的角质细胞脱落而排出体外;二是色素在皮肤内被分解、溶解、吸收后,在体内经血液循环系统排出体外。


  细胞水平的功效测定


  1、生化酶学法检测酪氨酸酶的活性


  酪氨酸酶是形成黑素的关键酶,对酪氨酸酶抑制作用越好,祛斑效果越明显,因此可以通过测定样品对酶活性的抑制率来评价样品的增白效能。


  高瑞英等人通过酪氨酸酶活性实验对当归提取物的美白功效进行评价,试验表明当归纯水提取液在较高浓度下会有激活作用,其醇提取液有较强的抑制酪氨酸酶的作用。


  2、黑素细胞增殖测定


  黑素细胞增殖测定的方法常采用四甲基偶氮唑蓝比色法即MTT法,黑素细胞的线粒体脱氢酶能将染料MTT转变为不溶的紫色甲瓒(formazan)颗粒,后者的生成量与细胞数目和细胞活性呈正相关,用二甲亚砜(DMSO)溶解所生成的甲瓒,通过检测光密度值变化,可间接反映细胞生长及增殖活性。


  3、黑素合成影响检测


  黑素合成影响检测常用Hunt法,即在适当浓度的对数生长的细胞内加入不同浓度的试验样品,经过培养后用酶标仪在490nm处测出D(λ)值、用相同方法作一空白组,根据抑制黑素合成率[(空白D-实验D)/空白Dx100%]来评价祛斑效果。


  动物试验法


  动物试验法一般可以采用棕色或黑色成年豚鼠10只,将其背部刮毛形成若干1cmx2cm大小的去毛区,然后用棉棒将化妆品依次涂布一圈,每日2次,并设空白对照。28天后取皮肤活组织,固定、包埋、切片,进行组织学观察,基底细胞中含黑色素颗粒细胞计数及多巴阳性细胞计数。此方法采用黄棕豚鼠,其皮肤黑素细胞和黑素小体的分布近似于人体,试验结果重复性好,较小鼠模型更宜于验证化妆品的祛斑功效。


  人体试验方法


  对于祛斑产品的人体测试方法中,研究人员大多数采用Lab色度系统光谱光度计和皮肤黑色素仪来测量皮肤颜色变化从而反映出祛斑效果。


  崔浣莲等人选择若干名志愿者,利用光谱计对受试者的左、右脸颊以及颈部做阶段性测试,结合皮肤黑色素仪器,通过皮肤色度的改变来评价祛斑产品的功效,结果表明使用仪器评价化妆品功效是种简单易行的方法。


  万苗坚等通过选择若干名黄褐斑受试者,利用受试者自评与Lab光度计结合的测试方法对公司的美白祛斑产品功效做出评价。