化妆品多数含有丰富的营养物质，有利于微生物的滋生，通常需要加入一定量的防腐剂防止其腐败变质。传统防腐剂多为化学合成，有的使用过量会对皮肤产生刺激作用，甚至致敏。随着经济的发展和人民消费观念的转变，市场上无添加防腐剂化妆品越来越受到消费者关注。而无添加防腐剂化妆品到底是什么？真的没有添加防腐剂？是否真的安全呢？

　　作为第三方检测中心，中科测试机构拥有CMA和CNAS认证检测资质，检测设备齐全，数据科学可靠，可出具国家认可的无添加防腐剂化妆品检测报告。

　　无添加化妆品的概念

　　“无添加”化妆品的概念来源于日本，指的是未添加日本政府规定的102种对皮肤有害的化学添加物的化妆品。

　　同样，我国化妆品行业中的无添加防腐剂化妆品也并非真的未添加防腐剂，而是指起防腐作用物质既不在《化妆品安全技术规范》（2015年版）（以下简称《规范》）中化妆品准用的51个防腐剂之内，又不在该《规范》化妆品禁用的1290种物质之列，包括多元醇、有机酸等化合物，以及一些动植物提取物和微生物发酵产物。水活度是指在一定温度和压力下，能被微生物利用的实际含水量，为物质中水分含量的活性部分或者自由水。水活度和pH直接影响微生物的繁殖，与无添加防腐剂等因素共同组成了该类化妆品的防腐体系。

　　市售无添加防腐剂化妆品大多为多剂量包装，其防腐体系效能是否满足需求，在有效期内尤其是开封后能否有效抑制微生物的污染和繁殖有待考察；但目前我国《规范》尚缺乏防腐效力检查的相关方法。可参考《CTFA微生物指南》（2007年版）《AOAC官方方法：998.10非眼用水溶性化妆品和洗浴用品中防腐剂的效力》（2009年版）及ISO 11930：2019《化妆品微生物学及防腐性能评价》进行防腐挑战试验。

　　防腐挑战实验菌种与仪器

　　大肠埃希菌（Escherichiacoli）[CMCC（B）44102]、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa[CMCC（B）10104]、枯草芽孢杆菌CMCC（B）63501]、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus[CMCC（B）26003]、白色念珠菌（Candida albicans[CMCC（F）98001]、黑曲霉（Aspergillus niger[CMCC（F）98003]。

　　SCDLP液体培养基、改良卵磷脂肉汤、DE中和肉汤；胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基。

　　AII型生物安全柜、恒温培养箱、压力蒸汽灭菌器、pH测试仪、水分活度仪。

　　防腐挑战实验方法

　　1、微生物计数测定

　　按《规范》第五章微生物检验方法进行样品的菌落总数及霉菌和酵母测定。

　　2、中和剂筛选试验

　　国外相关标准均要求在开展微生物挑战试验前先进行中和剂筛选试验。按《中国药典》（2020年版）（以下简称《药典》）四部通则“1105微生物限度检查法”制备菌悬液。将金黄色葡萄球菌记为GP，大肠埃希菌和铜绿假单胞菌按体积比1：1混合后记为GN，白色念珠菌和黑曲霉按体积比1：1混合后记为YM，制成含菌数约为1x103CFU/mL的工作菌悬液。

　　参考《CTFA微生物指南》（2007年版）“M-3水溶性个人护理产品防腐效能测定方法”，以SCDLP液体培养基、改良卵磷脂肉汤、D/E中和肉汤为中和剂，按ISO 11930：2019方法进行中和剂筛选试验。

　　3、防腐挑战试验

　　菌悬液制备同中和剂筛选试验。将金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌和黑曲霉5种菌混合，制成细菌含菌数约为1x108CFU/mL霉菌和酵母菌含菌数约为1x107CFU/mL的工作菌悬液。待测样品单包装装量足够试验用且容器便于按无菌操作技术接人试验菌液、混合及取样的直接在原包装中加入体积分数1%的菌悬液；其余样品取出20g（mL）样品分别转移至适宜的无菌容器中，加入0.2mL菌悬液，充分混合均匀，使得样品中细菌接菌量为106CFU/g（mL），霉菌和酵母菌的接菌量为106CFU/g（mL）。将上述混合菌液的样品置20~25℃避光贮存。完成待测样品的接种后（1h内），对制备好的混合菌悬液进行计数，作为0h的数据。分别在1，7，14和28 d的时间点取样。每次取1g（mL）待测样品，加入9mL经中和剂筛选试验中确定的中和剂中，充分混匀，并进行梯度稀释，用TSA于36℃培养48h测定菌落总数；用SDA于28℃培养5~7天测定霉菌和酵母菌总数。若TSA上有霉菌和酵母菌生长，实际细菌生长数量需减去霉菌和酵母菌数量。降低率=接种菌数-各取样间隔存活菌数）/接种菌数x100%。

　　4、pH值及水活度测定

　　按《规范》第四章理化检验方法进行样品的pH值测定。目前《规范》中尚无化妆品水活度的测定方法，故参照GB 5009.238-2016《食品安全国家标准食品水分活度的测定》进行样品的水活度测定。