荧光定量 检测介绍
荧光定量检测是一种利用荧光信号进行定量分析的技术,通过对荧光信号的强度、波长等参数的测量,实现对样品中特定物质的定量分析。
荧光定量检测适用于生物学、医药学等领域中的DNA或RNA的绝对定量分析,包括病原微生物或病毒含量的检测,转基因动植物拷贝数的检测,RNAi基因失活率的检测等。此外,还可用于基因表达差异分析、基因分型、病原体定量测定等。
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荧光定量 检测方法
以探针法荧光定量 PCR 为例:PCR 扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。
开始时,探针完整地结合在 DNA 任意一条单链上,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收,检测不到荧光信号;PCR 扩增时,Taq 酶将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条 DNA 链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与 PCR 产物形成完全同步。
荧光定量 检测标准
GB/T 19495.5-2018 转基因产品检测 实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测方法
GB/T 36226-2018 不锈钢 锰、镍、铬、钼、铜和钛含量的测定 手持式能量色散X射线荧光光谱法(半定量法)