胶原蛋白是人体重要的结构成分物质，通过在细胞结构上形成支撑网络起到支撑器官、保护机体的作用。大量研究表明，胶原蛋白为弹性蛋白和胶原蛋白的合成提供了基础，胶原蛋白还可刺激成纤维细胞增殖，促进胶原纤维密度、直径的增加和透明质酸的产生。胶原蛋白可作为保湿剂加入面霜和凝胶，且具有抗衰老、抗皱、防紫外线等功效。

　　作为第三方检测中心，中科测试机构拥有CMA和CNAS认证检测资质，检测设备齐全，数据科学可靠，可出具国家认可的化妆品功效性评价报告。

　　胶原蛋白原料安全性评估

　　样品前处理。精确称量XX胶原蛋白5 g，加入25 mL蒸馏水，稍微晃动后置于80℃水浴锅中加热1h，使其充分溶解。冷却至室温后加蒸馏水补齐至50mL，4000r/min 离心20 min,吸取上清液，使用0.22μm除菌滤膜过滤，即得100mg/mL的驴骨胶原蛋白溶液。

　　细胞毒性评估。采用人表皮层细胞HaCaT和人真皮层细胞NHDFS评价XX胶原蛋白对人皮肤细胞的细胞毒性作用。将正常培养稳定的HaCaT细胞和NHDFS 细胞分别以1x105个/mL和6x104个/mL的密度铺板于96孔板，培养24h形成单层细胞后，分别加入10，5，2.5，1.25，0.63，0.31,0.16和0.08mg/mL浓度梯度的驴骨胶原蛋白继续培养24h和48 h。按照CCK-8试剂盒检测方法测定细胞相对活性，以不含受试物的培养基处理细胞作为阴性对照。细胞相对活性采用式（1）进行计算。当相对细胞活性乡80%，认为受试物在该浓度下无细胞毒性。

　　细胞相对活性=[（实验组OD值一空白组OD值）/（阴性对照组OD值一空白对照组OD值）]x100%

　　光毒性评估参考《化妆品安全技术规范》（2015年版）的《化妆品用化学原料体外3T3中性红摄取光毒性试验方法》进行检测。眼刺激/腐蚀性评估参照SN/T 2329-2009《化妆品眼刺激性/腐蚀性的鸡胚绒毛尿囊膜试验》规定方法进行测定0。皮肤刺激性/腐蚀性利用SN/T 4577-2016《化妆品皮肤刺激性检测重建人表皮模型体外测试方法》进行检测。

　　胶原蛋白原料功效测试

　　样品前处理。精确称量驴骨胶原蛋白5g，加入80 g蒸馏水，在80℃下浸提1h，冷却至室温后加入蒸馏水补足至100g，4000r/min 离心30 min，吸取上清液，使用0.22μm除菌滤膜过滤，即为质量分数为5%的XX胶原蛋白溶液。

　　屏障修复效果评价。将复苏好的人3D表皮模型转移至含有0.9 mL EpiGrowth培养液的6孔板中，吸取2倍检测浓度的受试物与4 mg/mL的SLS溶液等体积混合，将SLS-受试物混合液25 μL缓慢滴加于模型表面。以未处理的模型作为阴性对照，以2 mg/mL的SLS作为模型对照，以SLS-地塞米松混合液作为阳性对照，每组9个平行。给药结束后在培养箱（37℃，5%CO2）中培养24 h。使用装有无菌PBS的洗瓶清洗每个模型15次，然后使用1%的TritonX-100溶液分别刺激0，1和3 h，每个时间点3个模型。刺激结束后清洗模型15次，使用MTT法，以阴性对照组刺激0 h的存活率为100%，以异丙醇作为空自对照，以吸光值作为检测指标按照式（2）计算受试物处理后模型的组织存活率。同一实验分组内，取组织活力为50%左右的2个时间点数据进行绘图，计算直线回归方程根据回归方程计算组织活力为50%的时间，即为ET50。ET50大于模型对照组ET50的样品，具有屏障修复功效。

　　细胞相对活性=[（实验组OD值一空白组OD值）/（模型对照组OD值一阴性对照组OD值）]x100%

　　抗皮肤刺激评价，参考喻欢等的方法。将复苏好的人3D表皮模型转移至含有0.9mL EpiGrowth培养基的6孔板中吸取2倍检测浓度的受试物与4 mg/mL的SLS溶液等体积混合，将SLS-受试物混合液25 ML缓慢滴加于模型表面，以未处理的模型作为阴性对照，以2μg/mL的SLS作为模型对照以SLS-地塞米松混合液作为阳性对照，每组9个平行。给药结束后在培养箱（37℃，5%CO2）中培养24h。收集模型培养液，使用ELISA法检测并计算模型IL-1α含量。1L-1α含量显著小于模型对照IL-1α含量的样品，具有抗炎作用。

　　抗氧化能力评价。取0.5mL待测溶液，加入0.5mL的DPPHZ醇溶液，充分混匀后，将反应体系置于室温，避光反应20min。反应结束后，依次取反应液200L加入96孔板于517nm下读取吸光度OD值，计算样品对DPPH自由基的清除率。每个样品重复3次。